Lubes Marina

Riassunto in italiano
Campylobacter jejuni e C. coli colonizzano l'intestino dei volatili e in particolare del pollame in maniera asintomatica. Solo raramente, i germi causano nei volatili una patologia con lesioni epatiche e morte degli animali. C. jejuni e C. coli sono tra i principali responsabili di tossinfezione nell'uomo ed i prodotti avicoli contaminati ne rappresentano le principali fonti. Il numero di casi di tossinfezione sono spesso sottostimate anche a causa delle difficoltà nell'identificazione dei Campylobacter. Lo scopo di questa tesi è stato quello di valutare l'efficacia di un protocollo di identificazione di Campylobacter in PCR mediante due diversi kit di estrazione del DNA, rapido e a colonnine. Per la ricerca, sono state utilizzate due diverse tipologie di campione: campioni di fegato prelevati da galline ovaiole decedute per epatite vibrionica da Campylobacter e campioni fecali provenienti da una bambina affetta da enterite acuta. I campioni fecali sono risultati positivi in PCR per C. coli, utilizzando entrambi i tipi di kit di estrazione. Al contrario, i campioni di fegato risultati positivi per C. coli utilizzando il kit di estrazione a colonnine, risultavano negativi in seguito ad estrazione con kit rapido. Pertanto, il kit rapido consente una più rapida identificazione di C. coli in PCR, ma non sembra idoneo tutti i tipi di campioni, in particolare il fegato, probabilmente in quanto ricco di cellule e lipidi. Un protocollo di identificazione rapida da feci risulta particolarmente utile in campo umano, in cui il germe causa enterite ed una diagnosi eziologica di certezza consente rapidamente di giungere ad una terapia mirata.
Abstract in inglese
Campylobacter jejuni and C. coli infections are often asymptomatic in poultry. Rarely, they cause a disease characterized by liver lesions and mortality. Conversely, C. jejuni and C. coli are among the most responsible of gut infections in human and poultry products are the main source for the bacteria. Nevertheless, Campylobacter infections are underestimated because the diagnosis is generally not easy. The aim of this thesis has been to evaluate the efficacy of Campylobacter identification by PCR using two different kit for DNA extraction, a fast kit and a kit with columns. Two kinds of samples were tested: liver samples from layer hens affected by epatitis due to Campylobacter infection and feces samples from a child affected by acute enteritis. Feces samples tested positive for C. coli using both the rapid and the kit with columns for DNA extraction. On the contrary, liver samples tested positive for C. coli using the kit with columns but were negative after the use of fast kit of DNA extraction. Therefore, the fast kit is useful to quickly obtain the diagnosis by PCR but it seems not suitable for all kinds of samples such as liver, probably due to the high lipid and cells content. This kind of PCR protocol may be particularly useful for diagnosis of Campylobacter infection in human from feces because it may quickly lead to specific therapy.